p16基因甲基化特异检测方法的建立及其初步应用

摘要

目的建立p16基因中CpG岛的甲基化分析方法,即甲基化特异的PCR(methylation-specific polymerase chain reaction, MSP)方法及其初步应用. 方法用亚硫酸氢钠修饰变性后的被测DNA,随之进行甲基化、非甲基化特异的PCR扩增.应用MSP法分析白血病患者的白细胞p16基因5′CpG岛的甲基化变异情况. 结果用加热法变性DNA,亚硫酸氢盐修饰DNA,Wizard DNA 纯化树脂除盐、纯化修饰后的DNA都获得了成功,并建立了MSP分析p16基因甲基化的方法.白血病患者的白细胞p16基因的5′CpG岛有一定比例的甲基化变异.结论 MSP是一种较为简便、敏感且具有高度特异性的检测任何基因的CpG区域甲基化位点的分析方法.