大鼠肝星状细胞和枯否细胞的分离与培养方法

摘要

目的 建立一种可以同时分离大鼠肝星状细胞(HSC)和枯否细胞(KC)的方法.方法 选用SD 大鼠,经胶原酶和蛋白酶灌注肝脏后,用18%Nycodenz密度梯度离心,分离大鼠 HSC和KC,HSC处在界面,KC处在界面下.常规台盼蓝染色行细胞活力鉴定;荧光显微镜下观察自发荧光确定HSC的纯度;KC免疫细胞化学检测.结果 成功分离大鼠肝星状细胞和枯否细胞,HSC得率为2×107/肝,KC得率为(3～6)×106/肝,活性>90%,纯度>90%.结论 该方法建立的HSC和KC同时分离培养的方法,简单、易行、可靠,细胞纯度高,同时获得的细胞可保持良好的生物学性状.