miR-145反向调节WT-p53对前列腺癌细胞EMT和干细胞特性的抑制作用

摘要

目的 通过改变miR-145在前列腺癌(PCa)细胞中的表达,揭示miR-145反向调节野生型p53(WT-p53)抑制前列腺癌细胞EMT和干细胞特性的作用机制.方法 本研究采用低表达WT-p53的PCa骨转移细胞系PC-3作为研究对象,使其外源性表达WT-p53,在细胞生物学层面检测其迁移、侵袭、黏附等转移相关能力的变化,在分子生物学层面检测其Fibronectin、E-Cadherin和Vimentin等EMT表征蛋白的表达水平;同时通过观察其肿瘤球的形成能力变化,检测WT-p53上调对PC-3干细胞特性的影响.最后用miR-145的拮抗分子反向验证上述过程.结果 PC-3细胞高表达外源性WT-p53后,其迁移和侵袭能力受到了显著抑制,同时其黏附能力也明显增强.在分子层面,高表达WT-p53抑制了PC-3细胞中Fibronectin和Vimentin的表达,并同时上调了E-Cadherin的表达水平,表明PC-3的EMT受到了抑制.另一方面,高表达WT-p53的PC-3细胞的肿瘤球形成能力明显下降,表明PC-3的干细胞特性得到了有效抑制.更为重要的是,miR-145的拮抗分子能够逆转WT-p53对PC-3细胞侵袭性、EMT和干性的抑制作用.结论 WT-p53的突变甚至缺失可能促进PCa的骨转移,而这一过程可能是通过(至少部分通过)抑制miR-145的表达从而促进癌细胞的EMT和干性表达来完成.