2-BFI对氟化钠致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

摘要

目的通过观察神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)线粒体形态、功能及细胞凋亡的发生情况,探究唑啉化合物2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对氟化钠(NaF)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法用不同浓度NaF(0.5、1.0、1.5、2.0、4.0 mmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞增殖能力;用NaF和不同浓度的2-BFI(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)处理24 h,用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞增殖能力。应用透射电镜观察线粒体形态,用ATP检测试剂盒、线粒体红色荧光探针(TMRM)试剂盒检测线粒体功能,用TUNEL染色法检测细胞凋亡的发生情况,用蛋白印迹法检测Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果SH-SY5Y细胞存活率随NaF浓度的升高而逐渐下降,选定NaF后续实验浓度为2.0 mmol/L(P<0.01);2-BFI治疗24 h可以提高细胞存活率,在10 mmol/L时,细胞存活率较高,为99.169%,当浓度高于10 mmol/L时细胞存活率随之下降,选定10 mmol/L为2-BFI后续实验浓度。与对照组相比,NaF组线粒体形态改变,ATP水平和线粒体膜电位(Δψm)下降,细胞凋亡率上升,Bcl-2蛋白含量减少,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达增高;与NaF组相比,2-BFI给药组线粒体形态改善,ATP水平和Δψm升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白含量升高,Bax、cleaved caspase-3蛋白表达降低。结论2-BFI可以改善SH-SY5Y细胞线粒体形态及功能、减少SH-SY5Y细胞凋亡,从而对氟中毒发挥神经保护作用。