基于夹心酶联免疫吸附方法的大鼠及比格犬血浆中海洋药物GeXIVA1,2定量分析研究

摘要

GeXIVA[1,2]是利用cDNA克隆技术从我国南海海域的将军芋螺中鉴定的一种新型芋螺毒素,已开发成为新型镇痛药物。本研究建立并验证了大鼠及比格犬血浆中海洋药物芋螺毒素GeXIVA[1,2]的抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)检测方法。制备鼠单克隆抗体4B2及生物素标记兔多克隆抗体2#,使用棋盘法优化抗体配对浓度、最小稀释比例、温育温度、温育时间,建立抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证。动物实验经军事科学院军事医学研究院动物伦理与使用委员会批准(编号:IACUC-DWZX-2020-698)。结果表明建立的ELISA方法在大鼠及比格犬血浆中的定量范围均在1.25~80 ng·mL^(-1),精密度、准确度、选择性、特异性、稳定性、稀释线性、钩状效应均满足生物样本分析要求。本方法可用于新型海洋药物GeXIVA的临床前药代动力学研究。