人源蓝氏贾第虫病毒GLV1518-2322基因的表达及表达产物抗血清的制备

摘要

根据中国人源蓝氏贾第虫病毒(GLV)全基因组测序结果,将其全基因组cDNA上编码贾第虫病毒部分衣壳蛋白的GLV1518-2322基因克隆到原核表达载体pET-28c(+)上,构建了原核表达重组质粒pET-28c(+)-GLV1518-2322.SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,32kDa蛋白基因在大肠杆菌B21(DE3)plvsS中得到高效表达.以纯化的表达产物为抗原,免疫BalB/c小鼠,同时用病毒粒子免疫BalB/c小鼠,制备了中国人源蓝氏贾第虫病毒GLV1518-2322蛋白特异性抗血清,ELISA方法测得的纯化蛋白最适抗原包被浓度为1/400和病毒粒子抗血清最佳工作浓度为1/200.