地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质

摘要

采用原生质体裂解方法确定甲基丙二酰ＣｏＡ变位酶和消旋酶均是胞浆内酶。各经过四步纯化得到电泳纯酶。纯化ＭＣＭ酶的比活力为１２．８４ｕ／ｍｇ，纯化倍数为５２８，酶活回收为６０％，纯化的ＭＣＭ酶服从典型的米氏底物饱和曲线，对琥珀酰ＣｏＡ的辅酶Ｂ１２的Ｋｍ值分别为９．７２３μｍｏｌ／Ｌ和０．１２７７μｍｏｌ／Ｌ，经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０测定ＭＣＭ分子量约为１３４０００±２０００，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝