甲基营养菌WB-1甲胺磷降解酶的产生、部分纯化及性质

摘要

甲基营养菌WB1菌株在以甲胺磷作碳氮源的无机盐培养基上生长时，产生甲胺磷降解酶情况较好，培养20 h为细胞收获的适宜时期。所得细胞经过超声波破碎、吐温-20抽提、热处理(60℃,9min)、DEAE-纤维素32和CM-纤维素32柱层析等步骤，得到的酶制品比活力为18.0U/mg，收率78.8％，纯化倍数22.8。纯化的酶制品经连续聚丙烯酰胺凝胶电泳，呈现一条主带，酶活力染色则呈现一条与之对应的活性谱带；该酶催化反应的适宜pH为9.0，底物专一性不强，Hg2+、Mn2+、Cu2+对酶有强烈的抑制作用。部分纯化酶制品在-20℃(0.1md/L的磷酸盐溶液中)存放5d，酶活力丧失约60％。