采用苯酚羟化酶基因特异引物检测苯酚降解菌*

摘要

根据苯酚羟化酶基因高度保守序列设计了一对该基因的特异PCR引物.采用该特异引物从苯酚降解菌醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)PHEA-2的总DNA中扩增到唯一一条大小为684bp的片段.该DNA片段与已知的A.calcoaceticus NCIB8250的苯酚羟化酶基因具有高度的同源性,其核苷酸序列的同源性为84%,推导的氨基酸序列的同源性为98%.对苯酚和非苯酚降解菌株的PCR扩增结果表明:所有苯酚降解菌均能扩增出684bp的特征片段,而非苯酚降解菌则无PCR条带.对炼焦废水中的细菌群落进行PCR扩增和生化特性检测表明:显示684bp特征片段的菌株均具有苯酚降解特性.上述结果表明,利用苯酚羟化酶基因的特异引物可对环境中的苯酚降解菌株进行准确快速的PCR检测.