荧光假单胞菌M18的rpoS基因克隆及其功能分析

摘要

从荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescent sp.)M18基因组中克隆了RNA聚合酶的稳定期σs因子编码基因rpoS,推测其氨基酸序列与铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的同源性分别为99.1%、87.35% 和87.8%.利用体外定点插入突变和同源重组技术,构建了M18的rpoS突变株M18R-.对突变株M18R-合成抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)和藤黄绿菌素(Plt)的动力学分析结果表明,在KB或PPM培养基中,突变株合成PCA的能力比野生型分别提高了25或5.78倍,但Plt的积累量不受影响.与野生型相比,突变株对碳源饥饿的耐性下降.同时,在碳源饥饿条件下对过氧化氢、乙醇和和氯化钠等环境胁迫的交叉保护性减小,存活率显著降低.