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荧光假单胞菌M18的基因插入突变菌株M18G的方法

摘要

一种荧光假单胞菌M18的基因插入突变菌株M18G的方法,属于基因技术领域。具体方法的步骤如下:根据大肠杆菌,铜绿假单胞菌和欧文氏菌菌种中gacA基因的保守序列,设计兼并引物用于聚合酶链反应扩增荧光假单胞菌M18基因组的gacA片段;以该片段为探针,从M18的基因组柯斯质粒文库中筛出阳性克隆;运用同源重组剔除技术和固相滤膜三亲杂交方法,获得M18菌株的gacA突变株M18G;吩嗪-1-羧酸的提取和定量测定:取发酵菌液180μl,加20μl6N盐酸酸化,震荡裂解细胞,经3倍体积的氯仿,震荡平衡5min后,12000r/min离心5min,弃去上清液和细菌碎片,取5μl下层液相,经HPLC测定吩嗪-1-羧酸的产量。通过生物发酵工程技术,该菌株可用于开发生产高效,低毒的新型生物农药。

著录项

  • 公开/公告号CN1539959A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2004-10-27

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 上海交通大学;

    申请/专利号CN200310108302.2

  • 发明设计人 许煜泉;葛宜和;

    申请日2003-10-30

  • 分类号C12N1/21;C12N15/31;C12N15/11;C12N15/63;C12Q1/68;C12P1/04;

  • 代理机构31201 上海交达专利事务所;

  • 代理人王锡麟;王桂忠

  • 地址 200240 上海市闵行区东川路800号

  • 入库时间 2023-12-17 15:34:51

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2009-07-01

    发明专利申请公布后的驳回

    发明专利申请公布后的驳回

  • 2005-01-05

    实质审查的生效

    实质审查的生效

  • 2004-10-27

    公开

    公开

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