猪白细胞介素-6在巴斯德毕氏酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达

摘要

白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)是一种具有多种生物学效应的细胞因子,在疾病诊断与疫苗佐剂领域有广阔的应用前景.在本试验中,猪白细胞介素-6(pIL-6)的cDNA序列被克隆入甲醇酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9K中,并转化入P.pastoris GS115菌株.其重组菌株GS115/pPIC9K-IL6经1%甲醇诱导后,能分泌表达分子量约为24.5KD的重组蛋白,Western blot确证为pIL-6.该酵母表达产物无N端糖基化修饰.用依赖IL6生长的B9细胞株检测提纯后的pIL-6,其生物学活性可达8×104IU/mg.