肠球菌溶血及非溶血菌株对小鼠巨噬细胞表达TNF-α的影响

摘要

[目的]探讨肠球菌溶血菌株及非溶血菌株对小鼠巨噬细胞RAW264.7表达TNF-α的影响.[方法]用多粘菌素B抑制排除内毒素污染对实验的影响.肠球菌溶血菌株、非溶血菌株各11株,以菌/细胞比30:1感染RAW264.7细胞1h,加入200μg/mL 氨节青霉素继续培养24h,分别于感染后3、6、9、24h,用EUSA方法检测不同观测点细胞培养液中肿瘤坏死因子TNF-α的含量,并用逆转录一聚合酶链反应方法(RT-PCR)比较肠球菌溶血、非溶血菌株感染6h后TNF-α mRNA表达的差异.[结果]感染的RAW264.7细胞培养液中检测不到TNF-α.肠球菌溶血株感染组细胞培养上清液中各观测点的TNF-α的平均含量(pg/mL)均比非溶血株性组高.经t检验,P< 0.01,差别有显著性.RT-PCR法检测其mRNA的表达也有相同结果:TNF-α mRNA在肠球菌溶血株感染细胞中的相对表达量比非溶血株感染的细胞高,经t检验,P<0.05,差别有统计学意义.结论 肠球菌溶血株比非溶血株更能促进小鼠巨噬细胞RAW264.7产生TNF-α炎症因子.