ECF-σ5因子参与阿维链霉菌中阿维菌素合成和环境胁迫的研究

摘要

[目的]研究阿维链霉菌中ECF-σ5因子对阿维菌素合成、形态分化和环境胁迫的调控,为揭示阿维菌素生物合成的调控机制和ECF-σ因子的调控网络提供依据.[方法]构建sig5基因缺失、回补和过表达菌株,通过形态观察和摇瓶发酵实验初步确定σ5对形态分化、菌体生长和阿维菌素合成的影响.进一步通过RT-qPCR、EMSA和ChIP实验寻找确定σ5的靶基因,再通过胁迫实验揭示σ5可能参与的胁迫反应.[结果]对sig5相关突变株的摇瓶发酵和形态观察结果表明,σ5对阿维菌素合成具有抑制作用,但不影响菌体生长和形态分化.sig5基因缺失导致阿维菌素生物合成途径特异性正调控基因aveR和结构基因aveA1的转录水平提高,但σ5并不与aveR和aveA1的启动子区结合.σ5能结合在自身基因及附近基因SAV612、SAV615、SAV618的启动子区,正调控这些基因及所在操纵子的表达.胁迫实验暗示σ5可能参与渗透压引起的胁迫反应.[结论]ECF-σ5因子在转录水平间接负调控阿维菌素的合成.