靶向Survivin siRNA对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达的影响

摘要

目的 探讨靶向Survivin siRNA对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达的影响.方法 构建靶向Survivin siRNA载体,按照质粒类型分为空白对照组、阴性对照组和阳性实验组,空白对照组仅加入Lipofectamine 2000,阴性对照组加入空载质粒,阳性实验组加入靶向Survivin siRNA质粒,采用RT-PCR检测Survivin、ER mRNA表达水平,采用Western blot检测细胞Survivin、ER蛋白表达水平,并采用MTT法检测各组对MCF-7细胞增殖抑制率.结果 以β-actin作为内参照,空白对照组Survivin、ER mRNA表达量分别为(1.17±0.14)和(0.79±0.11),阴性对照组分别为(1.15±0.12)和(0.80±0.09),阳性实验组分别为(0.43±0.03)和(1.94±0.41),阳性实验组SurvivinmRNA表达显著低于空白对照组、阴性对照组,ER mRNA表达显著高于空白对照组、阴性对照组(均P＜0.05);空白对照组、阴性对照组Survivin、ER mRNA表达量比较差异无统计学意义(均P＞0.05).Western blot结果显示,阳性实验组Survivin蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组,ER蛋白表达显著高于空白对照组和阴性对照组.细胞增殖实验结果显示,阳性实验组接种12、24、48 h后MCF-7细胞增殖的抑制率逐渐升高,并显著高于同时段空白对照组和阴性对照组(均P＜0.05).结论 通过siRNA技术干扰Survivin表达能够显著提高MCF-7细胞雌激素受体表达水平,靶向Survivin siR-NA在ER阳性乳腺癌的基因治疗中具有潜在的临床价值.