农杆菌介导淀粉分支酶基因RNAi片段转化玉米的研究

摘要

以玉米自交系"178"和"R18红"的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对潮霉素的敏感性实验,确定了潮霉素15 mg/L～25 mg/L为愈伤组织适宜的选择压.利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导将淀粉分支酶基因RNA干涉表达载体转入玉米自交系中,并对农杆菌转化系统的条件进行研究.结果表明:在感染液和共培培养基中分别都加入100 μmol/L乙酰丁香酮和50 mg/L抗坏血酸,农杆菌LBA4404的菌液OD600为0.6、侵染时间20 min为农杆菌转化的最适条件.对转化的愈伤组织分化诱导出苗后进行PCR检测,证明外源目的基因已整合到玉米基因组中,转化率最高达到2.4%.