绿色荧光蛋白标记的嗜水气单胞菌在越冬水体的饥饿存活及复苏

摘要

将绿色荧光蛋白标记的嗜水气单胞菌(Ah4332GFP)置模拟越冬水体(8-10℃)内,进行饥饿存活试验,用三种计数方法检查水体中的细菌数量变化 . 在41d后平板计数法(PC)降至0,而细菌总数法(DC)和活菌直接计数法(DVC)结果相似,只是D VC计数结果低于细菌总数1-2个数量级.显示细菌已经变成活的非可培养(Viable but nonculturable,VBNC)状态 .复苏试验表明,升高温度、添加鱼血清或新鲜培养的Ah4332GFP细菌上清及通过兔肠管结扎,均使VBNC状态的Ah4332GFP得到复苏.荧光显微镜和电镜观察处于可培养和VBNC状态的Ah4332GFP,后者的细菌细胞比前者体积明显缩小,形态由杆状变成了球形,但细胞膜和细胞壁是完整的,不是细菌L型.