美洲大蠊Per a7基因的克隆、表达及免疫学鉴定

摘要

根据原肌球蛋白基因序列设计引物,以我国南方地区美洲大蠊 Periplaneta americana RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出852 bp的全长编码片段,经序列分析发现该基因与NCBI公布的Per a7有3个核苷酸发生改变.将目的片段克隆到pET24a(+)表达载体中,在大肠杆菌BL21 Star获得表达,融合蛋白的分子量约为33 kD.利用蟑螂过敏性患者血清对表达产物进行Western blotting检测,出现明显的识别条带,说明表达产物具有IgE结合活性.