3种海洋鱼类肝微粒体EROD活性的测定

摘要

根据鱼类的生态习性选择了暖温性近岸底层岩礁鱼类褐菖鲉和浅海底层鱼类黄鳍鲷和黑鲷作为实验动物,系统地研究了0#柴油WSF诱导组和对照组褐菖鲉肝微粒体EROD动力学反应系统的测定条件,确定了最适测定条件为:pH值7.60、温度15℃、底物7-乙氧基异吩恶唑浓度0.5 μmol/L、样品蛋白量100-800 μg、还原型辅酶Ⅱ NADPH 70 nmoVmL.诱导组和对照组的最适反应条件没有差别,但是诱导组的酶活性比对照组的高;对照组和诱导组EROD的Km值分别为0.144 μmol/L和0.357μmol/L,Vmax值分别为0.466 nmol min-1 mg-1蛋白和2.360 nmol min-1 mg-1蛋白.首次在我国建立了褐菖鲉肝微粒体EROD活性检测技术.此外,比较了上述3种实验鱼类肝微粒体EROD反应系统的最适pH值和最适温度.结果表明,与褐菖鲉不同,黄鳍鲷和黑鲷肝EROD反应最适pH值都是7.80,最适温度都是25℃.