等温滴定量热法和荧光滴定法研究十二烷基硫酸钠与纤维素酶的结合

摘要

用等温滴定量热法和荧光滴定法研究了阴离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)与绿色木霉纤维素酶相互作用的热力学.SDS结合纤维素酶的亲和力较弱,为较小的放热反应,并伴随着一定程度的熵增,为焓和熵共同驱动的反应,而且存在着显著的焓-熵补偿作用.该结合过程的摩尔恒压热容为较大的负值(-186 J@mol-1@K-1),这表明疏水相互作用是形成复合物的主要作用力.SDS的加入使纤维素酶的内源荧光发生猝灭,同时导致该蛋白荧光光谱最大发射峰位的红移和酶活力的部分丧失,这表明SDS与纤维素酶的相互作用既包含结合反应也包含SDS诱导该蛋白部分去折叠的过程.