水稻Argonaute 2蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

摘要

为了制备水稻Argonaute 2 (AGO2)的多克隆抗体,该研究采用RT PCR扩增OsAGO2蛋白165～401 aa片段和440～570 aa片段的编码序列,并构建了2个原核表达载体.诱导表达重组蛋白后注射家兔,制备了相应的多克隆抗体,最后利用Western blot初步分析水稻AGO2蛋白的表达模式.结果表明:成功构建2个表达载体,通过诱导获得了分子量约为30 kD和23 kD的重组蛋白.其中,以440～570 aa片段为抗原所制备的多克隆抗体免疫印记效果较好.Western blot表明在水稻花药、愈伤组织及小穗中检测到OsAGO2表达.该研究为进一步深入探讨水稻OsAGO2基因的特性与功能奠定了基础.