金银花丙酮酸激酶基因的克隆与表达特性分析

摘要

采用RT-PCR和RACE技术,首次从金银花中克隆丙酮酸激酶基因全长cDNA,命名为LjPkc(GenBank 登录号JQ621946.1),LjPkc基因编码区序列全长为1 533 bp,共编码510个氨基酸.基于基因序列亲缘关系分析结果显示,LjPkc基因与烟草Pkc基因亲缘关系最近,属于双子叶植物Pkc基因家族.蛋白质亚细胞定位分析认为LjPkc在线粒体或叶绿体中发挥作用.LjPkc蛋白质的三维空间结构预测结果显示,LjPkc蛋白主要由α-螺旋、不规则盘绕组成.定量PCR检测发现,LjPkc基因在金银花不同组织中广泛表达,但表达水平各有差异,黄花中表达量最高.该研究丰富了Pkc基因库资源,为揭示LjPkc基因在金银花糖代谢方面的生物学作用奠定了基础.