火鹤AaSERK基因克隆及其在体细胞胚胎发生中的表达分析

摘要

为了探讨体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(SERK)基因在火鹤体细胞胚胎发生中的作用,以火鹤胚性愈伤组织为材料,利用RT-PCR结合RACE技术,克隆了火鹤体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶基因(AaSERK),通过实时荧光定量PCR(Real time-PCR)技术分析了AaSERK的相对表达量.结果显示:(1)该基因全长为1 949 bp,包含1 866 bp开放阅读框,编码蛋白由622个氨基酸组成.(2)预测该基因具有SERK家族典型的结构域:1个信号肽、1个亮氨酸拉链结构域、5个富亮氨酸重复序列结构域、1个SPP基序、1个跨膜结构域、含11个亚区的激酶结构域、1个C端结构域.DNAMAN分析显示,该基因编码的氨基酸序列与其它植物的一致性达到65％～89％.(3)在离体诱导体细胞胚胎发生的各阶段中,AaSERK基因在诱导阶段及发育培养阶段微弱表达或者几乎不表达,在继代培养第30天的胚性愈伤组织中表达量最高.推测该基因可以作为火鹤体细胞胚胎发生的一个标记基因.