蒺藜苜蓿DGAT1基因的克隆和功能鉴定

摘要

该研究采用RT-PCR与电子克隆的方法,从蒺藜苜蓿cDNA中克隆得到2个编码二脂酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGAT)的基因Mt DGAT1-1和Mt DGAT1-2.Mt DGAT1-1长1 620 bp,编码539个氨基酸;MtDGAT1-2长1 524 bp,编码507个氨基酸.多序列比对显示,MtDGAT1-1和MtDGAT1-2编码蛋白具有典型的植物DGAT1结构域.表达分析显示,MtDGAT1-1和MtDGAT1-2在根、茎、叶、花、种子中都有表达,在种子发育中高表达,且Mt DGAT1-1于种子发育的中前期高表达,而MtDGAT1-2于种子发育的中后期高表达.酵母互补实验证实,MtDGAT1-2编码蛋白具有DGAT酶活性,能够恢复H1246的TAG合成和油体形成;而MtDGAT1-1编码蛋白不能恢复H1246的TAG合成和油体形成.