温度和底物对大豆液泡膜H+-ATPase二级结构的影响

摘要

利用圆二色性光谱,检测了纯化的大豆液泡膜H+-ATPase在不同条件下蛋白二级结构的变化.液泡膜H+-ATPase的圆二色光谱对温度敏感,25°C、37°C分别保温10分钟和20分钟,208nm和222nm双负峰变小,酶蛋白α-螺旋含量减少,与25°C相比较,37°C保温时酶蛋白构象的变化更为剧烈、迅速.不同磷酸数目的腺苷酸处理,液泡膜H+-ATPase的α-螺旋含量均降低,降低程度为ADP>AMP>ATP,酶蛋白二级结构对底物磷酸基数目敏感;用含不同碱基的三磷酸核苷酸处理,ATPase的α-螺旋含量均降低,降低程度为GTP>CTP>ATP,酶蛋白二级结构对底物碱基类型敏感.与最适底物ATP相比,其它底物对酶蛋白二级结构的影响更为剧烈.