Tet调控的EB病毒LMP1基因导入鼻咽癌细胞系表达的研究

摘要

本文利用Tet-on基因表达系统建立了一株可诱导EB病毒LMP1基因表达的鼻咽癌细胞株.首先将Tet-on基因调控系统的调节质粒pTet-on导入鼻咽癌细胞系HNE2中, 用rtTA反应性荧光素酶报道基因pTRE-luc挑选高诱导、低背景的克隆, 第二轮转染将构建的反应质粒pTRE-LMP1导入得到稳定转染的阳性克隆, 对各克隆用Western 印迹方法进行强力霉素(Dox)诱导效应检测, 其中L7对Dox具有较好的剂量反应依赖性, 诱导表达量可增加10倍左右.LMP1在鼻咽癌细胞可调表达对于分析其不同程度的表达在鼻咽癌发生中的作用具有重要价值.