蝮蛇类凝血酶基因的分析及表达研究

摘要

从蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)毒腺中抽提总RNA, 经RT-PCR扩增该基因, 克隆后经全序列测定, 蝮蛇类凝血酶pallase的cDNA长708个核苷酸, 即编码236个氨基酸; 根据同源性, 推测该类凝血酶pallase的活性中心为His41、Asp86和Ser182; 二硫键为Cys7-Cys139、Cys26-Cys42、Cys74-Cys234、Cys118-Cys188、Cys150-Cys167和Cys178-Cys203; 该蝮蛇毒类凝血酶cDNA序列及推导的氨基酸序列均为首次报道. 构建T7启动子控制下的pallase的大肠杆菌表达质粒, IPTG诱导pallase获得表达.