土传线状小麦黄花叶病毒浦江分离物NIb基因的克隆及序列分析

摘要

根据已发表的日本小麦黄花叶病毒（ｗｈｅａｔｙｅｌｏｗｍｏｓａｉｃｂｙｍｏｖｉｒｕｓ，ＷＹＭＶ）ＲＮＡ１核苷酸序列，设计了一对引物ＮＩｂ０１／ＮＩｂ０２，用来扩增浙江浦江土传线状小麦黄花叶病毒分离物ＮＩｂ基因的全长序列。以表现典型病症的小麦植株病叶总ＲＮＡ为模板，Ｏｌｉｇｏｄ（Ｔ）１８为引物合成第一链ｃＤＮＡ，用ＲＴＰＣＲ法扩增浦江分离物ＮＩｂ全长基因，并将此基因直接克隆到ｐＧＥＭＴ质粒中，进行全序列测定。结果表明该分离物与日本ＷＹＭＶ相应序列具有很高的同源性，而与小麦梭条斑花叶病毒（ＷＳＳＭＶ）存在很大的差异，因此认为浦江病毒分离物为ＷＹＭＶ。