南芥菜花叶病毒高灵敏度检测方法的建立及应用

摘要

以感染ArMV的百合种球制备粗提液,分别用聚乙二醇(PEG-6000)和免疫磁珠(Immuno-magnetic beads,IMB)进行富集处理,以富集处理后的样品进行ELISA、RT-PCR和SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测.结果表明:富集处理能显著提高这些方法从百合种球样品中检测ArMV的灵敏度.PEG-RT-PCR可检测稀释至10-5的样品,IMB-RT-PCR可检测稀释至10-3的样品.实时荧光RT-PCR检测也表明,PEG对百合种球中ArMV的富集效果优于IMB处理.对19批进境百合种球进行ArMV的RT-PCR检测,发现PEG或IMB富集处理提高了阳性样品的检出率.