野大豆盐碱胁迫相关GsTIFY6 B基因克隆及表达特性分析

摘要

为研究野大豆TIFY家族基因在野大豆耐盐碱过程中的分子特性及表达特性,以极度耐盐碱野大豆G07256的cDNA为模板,结合前期转录组数据,采用同源克隆的方法,获得了GsTIFY6B基因,其全长CDS大小为1047 bp.GsTIFY6B蛋白编码348个氨基酸,分子量为36.8 ku,等电点为9.12,是一个不稳定蛋白.系统进化树分析结果显示GsTIFY6B与大豆、绿豆、木豆和蔓花生的TIFY家族蛋白同源关系最近,含保守域TIFY和Jas.采用荧光定量PCR技术检测GsTIFY6B在野大豆不同部位以及盐碱胁迫和激素处理下的转录水平,结果表明,GsTIFY6B在根中相对表达量最高;在盐胁迫处理下,GsTIFY6B在野大豆根和叶中的表达量均表现出上调;在碱胁迫处理下,GsTIFY6B在野大豆叶和根中的表达量表现出先下调后上调表达,推测该基因可能参与野大豆盐碱胁迫防御反应;在ABA胁迫处理下,GsTIFY6B在野大豆的根中表现出下调表达,而在叶中6,12 h出现上调表达;在MeJA胁迫处理下,GsTIFY6B在根中先下调后上调表达,而在叶中表现出上调.研究表明,GsTIFY6B可能通过参与ABA和MeJA信号通路积极响应盐碱胁迫,对后期研究野大豆耐盐碱的分子机制提供了理论基础.