禽网状内皮组织增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表达

摘要

以本实验室保存的REV毒株为模板,采用RTPCR技术扩增了REV env部分基因,长为939 bp,并进行亚克隆到pMD18T质粒载体上,连接、转化、鉴定后得到阳性重组质粒pETenv,将目的片段进行序列分析,结果表明,该REV的env基因与已发表的SNV株、中国HA9901株以及A株同源性均达94%以上,推导的氨基酸同源性为94%以上。将该基因片段与原核表达载体pET32a重组,并将重组质粒转化至宿主菌BL21中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDSPAGE电泳,免疫印迹和薄层凝胶扫描分析,表达产物与理论推理一致;免疫印迹结果证明,表达的env蛋白可被REV阳性血清所识别。