不同饲养层对兔原始生殖细胞传代培养的影响

摘要

为了探讨不同饲养层细胞对兔原始生殖细胞体外培养与传代的影响,从14～18d的兔胎儿生殖嵴中分离得到原始生殖细胞(PGCs),分别培养在小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、兔胎儿成纤维细胞(REF)饲养层上或与同源兔胎儿生殖脊成纤维细胞(HEFgr)、兔睾丸支持细胞(RSC)共培养.观察兔类EG集落的生长状态,并检测其碱性磷酸酶活性.结果表明:4种方法均能分离克隆出兔类EG集落,碱性磷酸酶染色均呈阳性,但是采用共培养的模式分离得到的集落明显多于传统的饲养层模式.与RSCs共培养得到的EG集落数最多,保持未分化的时间最长,并传了8代,与HEFgr共培养得到的EG集落数与RSCs相比差异不明显,但最高只传了6代.培养在MEF上的兔类EG也能较好的保持未分化状态,传了4代.培养在REF上的兔类EG集落数目较少,出现分化时间较早,只传了3代.因此可以用与RSCs或HEFgr共培养的方法传代培养兔PGCs.