PCR-SSCP法分析载脂蛋白E基因多态性

摘要

目的:建立一种快速、简便、敏感的载脂蛋白E(ApoE)基因多态性检测方法.方法:酚/氯仿法提取46例原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)患儿全血基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增ApoE第四外显子,取PCR产物10μl加入等体积含有甲酰胺的上样缓冲液中,变性后行8%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显示结果.同时对PCR产物进行测序,确认单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)的检测结果.结果:PCR-SSCP法筛选出的各基因型与测序结果完全符合.结论:PCR-SSCP法可以快速准确地检测ApoE常见基因型.