氧化应激体外模型的构建及沙利度胺保护作用的研究

摘要

目的:通过构建体外氧化应激损伤模型,探讨沙利度胺(Thalidomide)的保护作用以及最佳的作用时间点和浓度.方法:体外氧化应激损伤模型采用脂多糖(LPS)构建,流式细胞术测定LPS最佳造模时间及浓度.MTT法测定沙利度胺的无细胞毒性浓度.流式细胞术测定沙利度胺最佳预处理时间及不同浓度沙利度胺的保护作用.结果:MTT结果显示沙利度胺浓度在0～125 mg/L范围内对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)基本是无损伤的,故选取沙利度胺最大浓度作为后续试验的浓度.流式细胞术结果显示,较低浓度的LPS即可引起凋亡,与处理6、12h相比,0.25、0.5 mg/L LPS分别处理HUVEC 24 h后的凋亡率增加(P＜0.05),且1 mg/L LPS处理HUVEC 24 h后凋亡率最高达到92％,相比处理6h和12 h后的凋亡率,差异有统计学意义(P＜0.05).2 mg/L LPS处理HUVEC在各个时间点与1 mg/L LPS处理后的凋亡率基本没有差别.100 mg/L沙利度胺预处理6h后凋亡率比模型组低,差异有统计学意义(P＜0.05),但是与预处理12、24 h相比,凋亡率基本没有改变,差异无统计学意义(P＞0.05).此外,100 mg/L沙利度胺预处理后凋亡率(31.5％)相比10 mg/L(52.6％)和1 mg/L(68.6％)的沙利度胺预处理,凋亡率下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:氧化应激损伤模型已成功构建,可用于进一步研究;沙利度胺可以保护LPS诱导的氧化应激下的细胞损伤,为沙利度胺进一步应用于临床提供了很好的依据.