河豚鱼基因组格式化粘粒文库的构建

摘要

目的构建河豚鱼基因组文库,为人类基因组的研究提供资料.方法以红鳍东方豚的精子DNA为材料,采用含有“外显子捕获”元件的粘粒(sCOGH2)作为载体,构建河豚鱼的基因组粘粒文库.结果该文库共有57 600个克隆,分别被保存在600块96孔细胞培养板中,插入片段的大小平均为35kb,相当于5.0个库容量,即从本文库中筛选到河豚鱼基因组任一单拷贝序列的机率为99.2%.该文库能承受10次以上的反复冻融,重组粘粒克隆在传代中仍保持高稳定性.以河豚鱼基因组DNA为探针进行Southern印迹分析,结果显示出强阳性的杂交信号.结论该文库符合粘粒文库的质量要求.