河豚鱼基因组细菌人工染色体文库的构建

摘要

目的研究模式生物--河豚鱼的基因组以及利用河豚鱼基因组"小而全”的特点研究人类基因组.方法以红鳍东方豚(Fugu rubripes)的精子DNA为材料,以pBelo BAC11为载体,构建河豚鱼基因组的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)格式化文库(gridded library).结果该文库包含23 040个克隆,分别保存在240块96孔细胞培养板中.经对100个随机抽样的克隆分析表明,插入片段平均大小为100kb,因此,该文库相当于河豚鱼单倍体基因组(400Mb)的6倍,即6个库容量.酶切分析10个克隆证明,经100代繁殖其插入片段仍然稳定不变.结论该文库符合BAC基因组文库的所有要求.