中国人2型糖尿病合并高甘油三酯血症患者脂蛋白酯酶基因突变及功能分析

摘要

目的研究中国人2型糖尿病合并高甘油三酯血症患者脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)基因突变及对酶功能的影响,从脂代谢途径探讨引发糖尿病的遗传因素.方法对高甘油三酯及血脂正常的2型糖尿病患者和正常人的LPL基因进行研究.利用PCR-SSCP、PCR-RFLP及DNA测序技术对LPL基因的启动子和10个外显子区域进行突变检测,针对特异位点进行体外定点突变和酶活力表达研究,利用网上工具平台Swiss-PDB Viewer对正常和突变蛋白进行二级结构模拟分析.结果在177例高甘油三酯2型糖尿病患者中检测到4种错义突变:Ala71Thr、Val18lIle、Gly188Glu和Glu242Lys,在正常血脂的糖尿病患者和健康人组中没有检出以上突变.这4种突变位于进化上高度保守的氨基酸位点,并分别在高度保守的外显子3、5及6区域.体内和体外酶活力研究表明,这4个突变均引起了酶活力降低甚至失活,其改变程度可以从它们所在序列的保守性、在酶功能结构域中的相对位置、相应的二级结构改变和氨基酸特性获得解释.结论在受累个体中,LPL突变是引起患者血浆甘油三酯升高的直接原因,是其发展成2型糖尿病的遗传性易感因素.