小鼠及人源化鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体的表达与纯化

摘要

目的：表达并纯化小鼠及人源化鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体，并初步分析比较两者的体外生物活性。方法；经ＤＮＡ重组的构建重组表达质粒，经ＩＰＴＧ诱导，在大肠杆菌中高表达两种单链抗体，用８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解包涵体后经ＩＭＡＣ纯化表达产物，并用凝血酶切除Ｎ端融合的（Ｈｉｓ）６，纯化的表达产物经复性后ＥＬＩＳＡ检测其活性，结果：两种单链抗体在大肠杆菌中表达量占全菌蛋白的５０％以上，经变性，纯化后纯度可达９７％