基于直接涂抹法的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定常见酵母样真菌截断值的确定及验证

摘要

目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)用于临床常见酵母样真菌鉴定的截断值,为酵母样真菌鉴定提供适宜的评分标准。方法收集从临床各类标本中分离出的酵母样真菌494株,将纯培养菌株直接涂抹至靶板上,滴加甲酸和基质液后进行MALDI-TOF MS鉴定,记录鉴定分值;同时进行基于真菌18srDNA的测序验证,以测序为金标准,评价MALDI-TOF MS鉴定的准确性;应用SPSS软件绘制ROC曲线,得出MALDI-TOF MS截断值,应用χ2检验比较本次研究得出的截断值与机器推荐截断值鉴定的正确率和错误率。结果27个菌种,463株酵母菌质谱鉴定与测序结果一致,鉴定正确率为93.7%;截断值为1.6时ROC曲线下面积最大,对应的敏感度为0.86,特异性为0.88;经χ2检验,与原截断值2.0相比,截断值1.6可将正确鉴定率提高至77.7%,差异有统计学意义(P<0.001)。结论根据前处理方法的不同计算酵母样真菌鉴定适宜的截断值,将有助于提高MALTI-TOF MS酵母样真菌的鉴定能力。