Adv-HIF-1αmu转染内皮祖细胞对CXCL12表达影响的研究

摘要

目的研究转染低氧诱导因子-1α突变型（hypoxiainduciblefactor-1αmu，HIF-1αmu）后的外源性内皮祖细胞（endothelialprogenitorcells，EPCs）中CXCL12的表达情况及对EPCs的影响。方法密度梯度离心结合差速贴壁法分离、培养EPCs并进行鉴定；以Adv—HIF-1αmu的最佳转染指数转染EPCs，获得含有目的基因处理的EPCs细胞，设为A组。B组为单纯转染Adv的EPCs。设未转染Adv—HIF-1αmu的EPCs为C组。WesternBlot检测转染后的EPCs中HIF-1的表达，检测转染后的EPCs培养液上清液中的CXCL12浓度及其对外源性EPCs迁移的影响。结果密度梯度离心结合差速贴壁法获得的EPCs能够结合UEA-1和摄取ac—LDL，并具有成血管作用；转染Adv—HIF-1αmu的EPCs表达的HIF-1及CXCL12高于单纯转染Adv的EPCs及未转染Adv—HIF-1αmu的EPCs（P〈0．05），且能诱导外源性EPCs的迁移。结论密度梯度离心结合差速贴壁法能够分离、培养符合特征的EPCs，转染Adv—HIF-1αmu的EPCs能够在常氧条件下高表达HIF-1及CXCL12，并诱导外源性EPCs的迁移。