木糖氧化无色杆菌致老年患者医院获得性肺炎的临床和基础研究

摘要

1、目的:(1)本研究回顾性分析了2008年5月~2011年12月,解放军总医院老年病房的28例木糖氧化无色杆菌所致医院获得性肺炎(HAP)患者的临床特点、药物敏感结果、治疗方法,为临床合理应用抗菌药物提供参考。(2)应用多位点序列分型(MLST)对临床分离菌株进行分子流行病学研究,得出等位基因型(Allele type)和序列型(Sequence type;ST)。(3)结合木糖氧化无色杆菌的耐药表型并检测该菌的整合子,寻找整合子可变区的耐药基因。
　　2、方法:(1)收集28例木糖氧化无色杆菌所致老年患者HAP病例的一般情况、既往使用抗生素的种类、基础疾病、临床表现、药敏结果及预后等,寻找易感因素,明确所致感染的临床特点及预后情况。(2)访问PubMLST数据库,通过聚合酶链式反应(PCR)技术扩增7对管家基因,得出所有菌株的等位基因型和ST分型。(3)通过PCR确定I、II、III类整合子在木糖氧化无色杆菌中的分布情况,对整合酶阳性菌株进一步检测整合子的可变区,分析可变区基因盒与耐药表型之间的联系。
　　3、结果:(1)本院发生的木糖氧化无色杆菌所致老年患者 HAP均发生在有基础疾病的患者,发病前体内留置导管史较多(26/28例)。60.7％(17/28例)患者发热,89.3%(25/28例)中性粒细胞百分比升高,85.7%(24/28例)C-反应蛋白(CRP)升高,但白细胞升高者仅占32.1%(9/28例);斑片状渗出影(94.2%,27/28例)为患者胸片主要表现;分离菌对氨基糖甙类药物耐药率较高。对复方新诺明、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制药较为敏感。初始治疗药物主要为碳青霉烯类(46.4%)、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制药(42.8%)、喹诺酮类(42.9%),30d死亡4例(14.3%)。(2)15株有12个ST分型,其中新发现的有11个。15株木糖氧化无色杆菌中均检出blaOXA-114基因,经测序后发现blaOXA-114q基因8株,blaOXA-114r基因3株,blaOXA-114h基因3株和blaOXA-114t基因1株。(3)15株木糖氧化无色杆菌均含有I类整合子。I类整合子可变区有4种不同片段的扩增阳性产物。2株534bp条带为aadB,对氨基糖甙类抗菌药物耐药。1株993bp的条带为耐药基因盒dfrA17和aacA4,分别对甲氧苄啶类和氨基糖甙类抗菌药物耐药。11株有1326bp条带为耐药基因盒aadB和aadA2,均对氨基糖甙类抗菌药物耐药。1株2220bp的条带为aac(6')-II、aadB、blaPSE-1,对氨基糖甙类和β内酰胺类抗菌药物耐药.
　　结论:(1)木糖氧化无色杆菌所致老年患者HAP临床表现多不典型,中性粒细胞比例及CRP升高敏感性较高,胸部X线多以斑片状渗出影为主要征象,复方新诺明、β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制药对该菌较为敏感。(2)ST分型为N8的两株菌中,均对氨基糖甙类、头孢菌素类、喹诺酮类、碳氢酶烯类药物高度耐药。因此在今后临床工作中应对出现的ST=N8的菌株给予高度重视。blaOXA-114-like基因存在于本组所有菌株中,并且该基因在木糖氧化无色杆菌中显示出了多样性。(3)整盒子可变区结构分析中发现6个不同的耐药基因盒,绝大多数耐氨基糖甙类药物基因盒,介导对氨基糖苷类药物耐药。

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前言

第一部分木糖氧化无色杆菌所致老年患者医院获得性肺炎病例分析

材料与方法

1材料与方法

2结果

3 讨论

结论

第二部分木糖氧化无色杆菌多位点序列分型及blaOXA-114-like基因分析

材料与方法

1 材料

2.方法

结果

讨论

结论

第三部分木糖氧化无色杆菌整合酶的筛选及整合子内部可变区耐药基因的研究

材料与方法

1 材料

2.方法

结果

1整合酶检测

2、I类整合子可变区检测结果

讨论

结论

全文总结

参考文献

文献综述

攻读学位期间发表文章

致谢