18β-甘草次酸对脂多糖诱导鼻黏膜炎症的影响

摘要

鼻息肉(nasal polyps，NP)是鼻腔鼻窦黏膜组织高度水肿的慢性炎性病变，常伴有慢性鼻-鼻窦炎，多数学者多倾向认为黏膜的慢性炎性反应是由多因素如细菌、真菌、解剖变异等诱发鼻腔外侧壁黏膜炎症所致。炎症是对创伤和感染的生理性和保护性反应，而炎性细胞的长期浸润可促使细胞因子（如HMGB1、TNF-α、IL-5、IL-8等）相互作用，鼻黏膜局部炎症反应不断扩大。
　　HMGB1属非组蛋白核蛋白，参与细胞分化、DNA的转录、复制与修复等[14]，属细胞核的成分，在胞外时发挥着炎症因子的作用。在鼻息肉组织中HMGB1表达水平较正常鼻黏膜组织增高，LPS诱导可促使细胞核内的HMGB1主动释放至细胞质及细胞外。
　　沉默信息调节因子是依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的第三类组蛋白去乙酰化酶，Sirtuins蛋白家族参与炎症机制的上游信号通路，在呼吸道细胞的细胞衰老、病原感染中发挥着重要的作用。本研究通过观察鼻息肉组织和正常鼻黏膜组织中Sirt6(silent information regulator2 related enzyme6)的表达，脂多糖诱导体外原代鼻黏膜上皮细胞后18β-甘草次酸对Sirt6和HMGB1的影响情况，以初步探讨Sirt6蛋白在正常鼻黏膜和鼻息肉中的作用，18β-甘草次酸是否在鼻黏膜上皮细胞中发挥抗炎机制。
　　第一部分沉默信号调节因子6在鼻息肉中的表达及意义
　　目的:初步探讨Sirt6在慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及意义。
　　方法:利用免疫组化和Western blot方法观察23例鼻息肉组织及8例正常鼻黏膜组织中Sirt6蛋白分布和表达水平。
　　结果:1.免疫组化显示Sirt6在鼻黏膜主要表达在上皮细胞胞核、间质细胞及腺细胞，在鼻息肉中的表达弱于正常鼻黏膜;2.Western blot显示Sirt6在鼻息肉中的表达量低于正常鼻黏膜。
　　结论:Sirt6蛋白主要表达在正常鼻黏膜细胞，其水平的降低可能参与鼻息肉的炎性反应，可作为慢性鼻窦炎伴鼻息肉的治疗指标。
　　第二部分18β-甘草次酸对脂多糖诱导鼻黏膜炎症的影响
　　目的:观察18β-甘草次酸(GA)对脂多糖(LPS)诱导的鼻黏膜上皮细胞炎症的影响。
　　方法:收集鼻息肉标本8例，所取标本的患者年龄在19-60岁之间，排除真菌性鼻窦炎、过敏性鼻炎、哮喘、鼻息肉复发再次手术者及其他全身性疾病及免疫学检查异常患者。术前停用糖皮质激素、抗组胺等药物治疗两周。LPS诱导原代培养的人鼻息肉上皮细胞48 h后，更换含18β-甘草次酸培养基作用48 h，荧光显微镜下观察Sirt6及HMGB1蛋白在细胞中的表达及细胞形态变化，Western blot检测蛋白的表达量。
　　结果:GA药物组与空白对照组及LPS诱导原代培养的人鼻息肉上皮细胞48h后相比，HMGB1表达局限于胞核，Sirt6主要表达与细胞核内。Western blot检测在GA作用后，上皮细胞中Sirt6、HMGB1表达量明显增加，在1μmol/L达到高峰值，两者呈现相关性。
　　结论:1μmol/L的18-β甘草次酸作用LPS诱导的原代人鼻黏膜上皮细胞后，能够促进Sirt6表达量的增加，并抑制细胞核中HMGB1向胞质及胞外的移位和释放，提示18-β甘草次酸在抑制人鼻黏膜上皮细胞的炎性反应中具有重要作用。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

参考文献

第一部分 沉默信号调节因子6在鼻息肉中的表达及意义

一．材料

二．实验方法

三．结果

四．讨论

参考文献

第二部分 18β-甘草次酸对脂多糖诱导鼻黏膜炎症的影响

一．材料

二．实验方法

三．结果

四．讨论

参考文献

综述

个人简历

致谢