脂多糖影响高糖环境下肝脏Kupffer细胞增殖和分泌功能的研究

摘要

背景和目的:近年来，临床上发现在糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)基础上罹患细菌性肝脓肿(pyogenic liver abscess，PLA)的发病率有增多趋势。同时发现，DM患者并发的PLA在病原菌、临床表现、治疗手段等诸多方面，与传统意义上不合并DM的PLA有重要区别，具体机制尚未完全阐明。本研究以临床实际问题为出发点，通过研究高糖环境对肝脏枯否细胞(Kupffer Cells，KCs)增殖和分泌功能的影响以及脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)的作用，探讨DM患者的KCs功能状态和DM患者罹患PLA的机制，为进一步的基础研究和临床防治工作提供新的思路。
　　方法:将BALB/C鼠肝KCs随机分为对照组（control，CON，11.1 mmol/L D-葡萄糖）、低糖组(low glucose，LG，5.6 mmol/L D-葡萄糖)、中糖组(medial glucose，MG，12.5 mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(high glucose，HG，25.0 mmol/L D-葡萄糖)、脂多糖+高糖组(lipopolysaccharide high glucose，LHG，25.0 mmol/L D-葡萄糖)、以及脂多糖对照组（LPS，11.1 mmol/L D-葡萄糖）。CON、LG、MG和HG组KCs培养24 h后，流式细胞仪检测细胞周期;培养24 h、48 h、72 h后，血球计数板进行细胞计数，四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖;收集细胞上清液，Luminex xMAP技术检测TNF-α、 IL-1β、IL-6水平。CON、HG、LPS和LHG组KCs培养24 h、48 h、72 h，LPS和LHG组加入等量LPS，继续培养6h，MTT法测定细胞增殖;收集细胞上清液，Luminex xMAP技术检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;其中LPS和LHG组在培养24h后加入等量LPS，继续培养6h，流式细胞仪检测细胞周期。
　　结果:KCs培养24 h、48 h、72 h时，细胞计数显示HG和LG组的KCs扩增数量明显低于CON和MG组，差异有统计学意义(P＜0.01)。MTT法测值显示HG和LG组KCs增殖功能明显受抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)。Luminex xMAP技术检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平，结果显示HG组KCs细胞因子水平明显低于CON组，差异有统计学意义(P＜0.05)。培养24 h时流式细胞仪的检测结果显示，HG和LG组的G0/G1期明显高于CON和MG组，S期和G2/M期明显低于CON和MG组，差异均有统计学意义(P＜0.01)。CON、HG、LPS和LHG组KCs的培养结果显示，LHG和LPS组的KCs细胞增殖功能明显激活，差异有统计学意义(P＜0.05)。HG组KCs的TNF-α、IL-1β和IL-6分泌水平明显低于CON、LPS和LHG组，差异有统计学意义(P＜0.01)。培养24h后，LPS和LHG组加入等量LPS，继续培养6h，细胞周期测定显示HG组的G0/G1期细胞分布高于CON、LPS和LHG组，差异有统计学意义(P＜0.01)。HG组的S期+G2/M期细胞分布低于CON、LPS和LHG组，差异有统计学意义(P＜0.01)。
　　结论:高糖环境下KCs增殖及分泌功能明显降低，细胞活性明显下降;脂多糖能激活并强化高糖环境中的KCs增殖和分泌功能。

目录

声明

摘要

引言

1 前言

2 材料与方法

3 实验结果

第二部分 高糖环境影响肝脏Kupffer细胞增殖及分泌功能

1 前言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

第三部分 脂多糖影响高糖环境下肝脏Kupffer细胞增殖和分泌功能的研究

1 前言

2 材料与方法

3 实验结果

4 讨论

结论

参考文献

文献综述 糖尿病胃轻瘫的发病机制和治疗研究进展

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