补肾降压理论及补肾降压方对自发性高血压大鼠miR-1调控心室肥厚ERK通路的影响

摘要

高血压是心脑血管事件的重要危险因素。现代医学在降压治疗上取得长足进步，但血压达标率仍不满意。中医药在平稳降压的同时还具有多环节保护机制，但对主要终点事件的证据有待加强。
　　 高血压病属“眩晕”范畴，从肝论治已成为现今临床治疗的“专家共识”。但通过对历代文献的系统梳理，发现与古代的“眩晕”相比，无论在内涵、病机还是治疗上，高血压与之均存在较大差异。由于在理论认识上存在不足，临床治疗上存在错位，导致中医药降压疗效不理想。这就是照搬古代肝风理论治疗高血压病收效欠佳的根源所在。因此，对本病病机特征的认识，切莫先入为主囿于阴虚阳亢，而应忠实于临床实际，突破既往从肝论治的理论局限，重新探索其证治规律。
　　 现代临床对高血压疾病的早期诊断、降压西药的早期干预以及不断优化与广泛运用，使升高的血压被迅速控制，直接改变了高血压病的自然进程，使其中医学病机演变规律已经发生了很大变化。进一步研究发现，肾虚是现今临床治疗高血压病面临的新问题。形成肾虚证的原因主要与年老导致的生理性肾虚，大病久病及肾导致的病理性肾虚，降压西药的不良反应，以及降压西药的治疗作用密切相关。因此，肾虚是现今高血压病病机关键，而补肾降压则为其重要治疗策略。
　　 “补肾降压方”是基于补肾降压的治则治法而形成的治疗高血压病的经验方。前期文献及临床研究显示，本方在改善高血压病患者肾虚证的同时，还能平稳降压。围绕“稳定血压”及“保护靶器官”这两大目标，本实验旨在探讨中药对血压、心率、左心室肥厚的影响及其调控机制，为补肾降压这一新策略提供实验依据。
　　 实验研究
　　 目的:观察补肾降压方对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)血压、心率及心室肥厚的影响，并探讨其对microRNA-1调控SHR心室肥厚ERK信号通路的影响。
　　 方法:以12周龄WKY大鼠为对照，将12周龄SHR大鼠随机分为SHR空白组、补肾大剂量组、补肾中剂量组、补肾小剂量组、卡托普利组，连续灌胃8周，每2周采用套尾法测定SHR清醒状态下尾动脉收缩压、心率。在22周龄时处死动物，观察心肌组织病理学切片，计算左心室质量指数，Rea-1 time PCR检测心肌BDNF，Ras，ERK1/2，c-fox mRNA的表达，Western blot检测心肌BDNF，Ras，ERK1/2，c-fox的蛋白表达，qRT-PCR检测大鼠左心室心肌组织miRNA-1表达。
　　 结果:(1)血压:卡托普利组及补肾大、中、小剂量组分别与SHR空白组相比较，血压均有不同程度的降低，差异有统计学性意义(P＜0.05)。其中卡托普利组降压幅度明显，与补肾中、小剂量组相比差异有统计学性意义(P＜0.05)，而与补肾大剂量组比较则无差异(P=0.257)。
　　 (2)心率:与SHR空白组相比较，补肾大剂量组心率下降幅度明显，差异有统计学性意义(P＜0.01)，而其余各组心率下降不显著。与卡托普利组相比，补肾大剂量组心率下降明显，差异有统计学性意义(P＜0.05)，而其余各组心率下降不显著。
　　 (3)左心室心肌质量指数:与WKY组相比，SHR空白组、卡托普利组及补肾降压方大、中、小剂量组均显著升高，差异具有显著统一学意义(P＜0.01);与SHR空白组相比，WKY组出现显著性差异，具有显著统计学意义(P＜0.01)，而卡托普利组及补肾降压方大剂量组也显示有差异，具有统计学意义(P＜0.05);与卡托普利组相比，WKY组显著降低，差异具有显著的统计学意义(P＜0.01)，而SHR空白组显著增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 (4) BDNF，Ras，ERK1/2及c-fox mRNA:①在BDNF mRNA表达方面，与WKY组比较，SHR空白组、卡托普利组以及补肾大、中、小剂量组心脏BDNFmRNA含量均有显著升高（P＜0.01）;与SHR空白组比较，WKY组、卡托普利组与补肾大剂量组心脏BDNFmRNA含量均有显著降低（P＜0.01），补肾中剂量组含量也降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，补肾小剂量未见显著性差异（P＞0.05）;与卡托普利组比较，WKY组、SHR空白组及补肾中、小剂量BDNFmRNA含量显著升高，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，补肾大剂量组含量也升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
　　 ②在Ras mRNA表达方面，与WKY组比较，SHR空白组以及补肾小剂量组心脏Ras mRNA含量均有显著升高(P＜0.01)，补肾大、中剂量组升高(P＜0.05)，而卡托普利组未见显著性差异(P＞0.05);与SHR空白组比较，WKY组、卡托普利组与补肾大、中剂量组心脏Ras mRNA含量均有显著降低(P＜0.01)，补肾小剂量组含量无统计学意义(P＞0.05);与卡托普利组比较，SHR空白组及补肾小剂量Ras mRNA含量显著升高，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)，WKY组、补肾大、中剂量组含量也升高，但差异无统计学意义。
　　 ③在ERK1/2 mRNA表达方面，与WKY组比较，SHR空白组以及补肾小剂量组心脏ERK1/2 mRNA含量均有显著升高（P＜0.01），补肾大、中剂量组升高（P＜0.05），而卡托普利组未见显著性差异(P＞0.05);与SHR空白组比较，WKY组、卡托普利组与补肾大、中剂量组心脏ERK1/2 mRNA含量均有显著降低（P＜0.01），补肾小剂量组含量无统计学意义（P＞0.05）;与卡托普利组比较，SHR空白组及补肾小剂量ERK1/2 mRNA含量显著升高，差异具有显著统计学意义（P＜0.01），WKY组、补肾大、中剂量组含量也升高，但差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　 ④在c-fox mRNA表达方面，与WKY组比较，SHR空白组、卡托普利组以及补肾大、中、小剂量组心脏c-fox mRNA含量均有显著升高(P＜0.01);与SHR空白组比较，WKY组、卡托普利组与补肾大、中、小剂量组心脏c-fox mRNA含量均有显著降低(P＜0.01);与卡托普利组比较，WKY组、SHR空白组及补肾大、中、小剂量c-fox mRNA含量显著升高，差异具有显著统计学意义(P＜0.01)。
　　 (5)mirRNA-1:与WKY组比较，卡托普利组未见统计学意义(P＞0.05)，而SHR空白组及补肾大、中、小剂量组均显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05);与SHR空白组比较，WKY组、卡托普利组与补肾大、中、小剂量组心脏mirRNA-1表达均显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.05);与卡托普利组比较，WKY组与补肾大剂量差异未见统计学意义（P＞0.05），而SHR空白组及补肾中、小剂量组均显著降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
　　 结论:(1)补肾降压方能够在SHR模型上稳定血压，减慢心率;(2)补肾降压方能在一定程度上逆转心室肥厚;(3)高血压心室肥厚可能与下调microRNA-1水平进而促使ERK信号通路及其关键靶标过表达有关;(4)补肾降压方逆转高血压心室肥厚的作用机制可能与上调microRNA-1水平进而抑制ERK信号通路及其关键靶标过表达有关;(5)补肾降压方各剂量组之间呈现出一定的剂量依赖性，且大剂量时降压，减慢心率，逆转心室肥厚，上调microRNA-1水平，及抑制ERK信号通路作用明显。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

第一节 中医药治疗高血压病的临床证据

1．背景

2．方法

3．结果

4．讨论

参考文献

第二节 中医药治疗高血压病的作用机制

1．背景

2．对血压变异的影响

3．对交感神经活性的抑制作用

4．对RAAS系统的影响

5．对血管内皮细胞相关因子的影响

6．对靶器官的保护作用

7．对糖脂代谢和胰岛素抵抗的影响

8．其它作用

9．结语

参考文献

第二章 补肾降压理论

第一节 高血压病病机古今异轨

1．“眩晕”与高血压病在内涵上存在差异

2．‘‘眩晕”与高血压病在病机上存在不同

3．内涵与病机差异的临床启示

参考文献

第二节 高血压病病机的现代认识

1．高血压前期与逸病

2．高血压病“三大病机”

3．结语

参考文献

第三节 肾虚是高血压病现代病机关键

1．年老导致的生理性肾虚

2．大病、久病及肾导致的病理性肾虚

3．降压西药不良反应导致肾虚

4．降压西药的治疗作用导致肾虚

5．高血压病肾虚证的现代研究及展望

参考文献

第四节 补肾降压是高血压病防治新策略

1．补肾降压源流

2．补肾降压法在高血压病中的运用

3．补肾降压法在血压难控因素中的运用

4．展望

参考文献

第五节 提高补肾降压疗效的关键

1．病证结合的治疗模式

2．冲药仿剂现代药理成果的临床运用

3．关键药物及剂量的临床运用

4．结语

参考文献

第三章 补肾降压方对自发性高血压大鼠miR-1调控心室肥厚ERK信号通路的影响

前言

第一节 补肾降压方对自发性高血压大鼠血压及心率的影响

1．材料

2．方法

3．结果

4．讨论

参考文献

第二节 补肾降压方对自发性高血压大鼠心室肥厚的影响

1．材料

2．方法

3．结果

4．讨论

参考文献

第三节 补肾降压方对自发性高血压大鼠miR-1调控心室肥厚ERK信号通路的影响

1．材料

2．方法

3．结果

4．讨论

参考文献

结语

创新点

致谢

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