hCTGF在酿酒酵母中的表达及其与FGF的基因反应差异

摘要

人结组织生长因子 (hCTGF)是一种富含半胱氨酸的生长因子,由人成纤维细胞和血管内皮细胞合成分泌,分子量为38KD.CTGF能够促进成纤维细胞和血管内皮细胞的分裂增殖,细胞外基质产生和细胞粘附作用,从而在血管生成、创伤修复和胚胎发育过程起着重要作用.尤其是在促进伤口愈合中,是一种很有效和应用前途的多肽类药物.该研究根据CTGF的结构特点,选择真核表达系统酿酒酵母进行表达研究.实验以pBV-CTGF为模板,经PCR 扩增获得目的基因,并在此基础上以加上Kazak列,克隆到载体pUC19上进行列分析,证明获得的基因片段核苷酸序列与预期一致.序列正确的CTGF片段插入到酵母表达载体pYES2 中,同时引入α因子前导肽基因,进行分泌表达研究.该实验为进一步研究开发结缔组织生长因子,和探索其作用机制奠定了理论基础和试验途径.

目录

摘要

前言

实验材料

实验方法

一重组克隆质粒的构建

二CTGF在酵母中的表达

三CTGF的活性及其与BFGF的基因反应差异

结果与分析

一重组克隆质粒的构建

二CTGF在酵母中的表达

三CTGF的活性及其与BFGF的基因反应差异

讨论

小结

附录

参考文献

综述

致谢