病毒载体介导的人β-珠蛋白基因转移研究

摘要

人类珠蛋白基因家族包括α和β两个基因簇,两个基因簇各功能基因呈红系组织特异、发育阶段特异、终产物始终维持平衡的表达.一旦平衡失调将导致地中海贫血.该文采用添加的方法,即将正常人β-珠蛋白基因导入β-地贫患者造血干细胞中,稳定整合后在成熟红细胞中适宜表达,用以纠正珠蛋白肽链的不平衡状态,这种基因治疗方法有望长期缓解或治愈β-地贫.构建六种不同的携带人β-珠蛋白基因和调控序列的反转录病毒重组体.含人β-珠蛋白基因的重组反转录病毒的包装与病毒滴度的测定.AAV介导的小鼠间接体内人β-珠蛋白基因转移研究.

目录

前言

第一部分：反转录病毒载体介导的转移的人β-珠蛋白基在MEL细胞中的整合与表达

材料与方法

一.实验材料

二.实验方法

结果

一.β珠蛋白基因反转录病毒重组体的构建

二、产β-珠蛋白基因反转录病毒细胞系的建立以及病毒滴度的测定

三、人β-珠蛋白基因反转录病毒重组体在病毒转导MEL细胞中的整合

四、人β-珠蛋白基因在病毒转导MEL细胞中的表达

五、重组体G1NaHS32Δβ 2.0，(1.1kb)来源于ψ2产病毒细胞系的重组开门见山毒转导MEL细胞后，人B-珠蛋白基因在MEL细胞中低水平表达的原因分析

第二部分腺相关病毒载体介导的间接体内人β-珠蛋白基因转移研究

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

结果

一、重组体AV53HS432Δβ 2.0Neo在BHK-21细胞系中的整合

二、获得高滴度的重组病毒

三、造血重建小鼠体内人β-珠蛋白基因的检测

四、人β-珠蛋白基因在造血重建小鼠体内的表达

讨论

小结

参考文献

文献综述

英文名词及缩写

致谢