应用人脂肪前体细胞构建工程化脂肪组织的实验研究

摘要

应用人脂肪前体细胞构建工程化脂肪组织的实验研究临床上已有应用自身脂肪移植体治疗包括软组织缺损等多种疾病的报道。但是，无论带蒂脂肪移植还是游离脂肪移植，都有其各自的不足。一方面，缺损量大，自体脂肪组织转移常常带来术区和供区损伤。 研究目的1.分离并培养人的脂肪前体细胞。 2.探索适合工程化脂肪组织生长的支架、微环境。探索目前比较常用的两种支架(藻酸钙和胶原海绵)作为人脂肪前体的载体的可行性。 3.探讨生长因子(bFGF)对脂肪组织形成的作用机制，以及缓释技术应用于脂肪组织工程的可能性。 研究方法1.利用胶原酶消化法分离、原代培养脂肪前体细胞，并诱导分化，鉴定细胞，将其作为种子细胞。 2.鼠尾胶原通过冻干和化学交联制备胶原海绵作为组织工程的支架材料。 3.明胶通过化学交联制备空白明胶微球。将其浸泡于bFGF溶液中。体外检验其bFGF释放性质。同时制备剂量不同的bFGF明胶微球。 4.将人脂肪前体细胞，胶原海绵，bFGF明胶微球和游离bFGF按照不同配比混合分为7组，分别植入裸鼠背部皮下。10周后，通过大体标本和病理切片观察新生组织的情况。 5.制备人脂肪前体细胞-藻酸钙复合物，体外观察细胞增殖和分化的情况，并注射入裸鼠背部皮下，8周后切取病理切片。 结论1.bFGF对于形成工程化的脂肪组织十分重要。bFGF明胶微球和人脂肪前体细胞和胶原海绵一起可以形成新的脂肪组织。bFGF缓释放比游离bFGF更有效，更有利于脂肪生成。以上三者中的任意二者联合，都未诱生脂肪组织。bFGF浓度过高，并不利于脂肪组织形成。 2.藻酸钙凝胶和人前脂肪细胞混合，并不适合脂肪组织工程。

目录

英文缩略词表

文献综述 工程化脂肪组织的研究进展

第一部分脂肪前体细胞的分离、培养和诱导分化

第二部分 胶原海绵、含bFGF的明胶微球与人脂肪前体细胞构建工程化的脂肪组织

第三部分 藻酸钙水凝胶与脂肪前体细胞构成工程化脂肪组织的体内和体外实验研究

结论

参考文献

致谢