三种免疫抑制剂和辛伐他汀对血管内皮细胞增殖及其分泌内皮素的影响

摘要

研究目的： 研究环磷酰胺(CTX)、沙利度胺(THAL)、白芍总甙(TGP)和辛伐他汀(SVT)对体外培养的EA.hy926内皮细胞(EC)增殖的影响，以及对其分泌的内皮素(ET-1)水平的影响，并研究环磷酰胺和辛伐他汀对内皮细胞ET-1基因表达的影响。 研究方法： 以四氮唑蓝染色法(MTT)比较环磷酰胺、沙利度胺、白芍总甙和辛伐他汀对内皮细胞增殖的影响；采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各种药物作用后内皮细胞培养液中ET-1水平的变化；用逆转录聚合酶链式反应的方法检测环磷酰胺和辛伐他汀对内皮细胞ET-1基因表达的影响；对实验结果采用SPSS统计软件(11.5)进行分析。 研究结果： 1.MTT法显示：CTX对EC的增殖有抑制作用，并随着作用时间延长而增加，在作用72h时抑制呈浓度依赖性，浓度为2000、500和150μmol/l时的抑制率分别为44.28％、22.7％和 21.55％(p<0.05)；THAL对EC的增殖无明显作用，且随时间延长而变化不大；TGP对EC的增殖有抑制作用，并随着作用时间延长而增加，在作用72h时抑制呈浓度依赖性；SVT在作用24h时对EC的增殖有促进作用，浓度为10、5和2μmol/l时抑制率分别为-14.37％、-21.57％和-21.67％(p<0.05)，随着SVT作用时间延长对EC的增殖呈抑制作用，72h时，浓度为10μmol/l和5μmol/l时抑制率分别为57.14％和 8.71％(p<0.05)。 2.ELISA法显示：与PBS溶剂对照组相比，CTX浓度为1000、150和50μmol/l时，可以显著抑制EC分泌ET-1，抑制率分别为18.59％、14.77％和13.72％(P<0.05)；与HPCD溶剂对照组相比，THAL浓度为10μmol/l时，可以显著抑制EC分泌ET-1，抑制率为27.75％(P<0.05)，THAL各浓度均与DMSO溶剂对照组无显著性差异；与乙醇和PBS混合液溶剂对照组相比，TGP浓度为36μg/ml时可以显著促进EC分泌ET-1；与无水乙醇溶剂对照组相比，SVT浓度为10μmol/l和5μmol/l时，可以显著抑制EC分泌ET-1的水平，抑制率分别为77.92％和78.72％(P<0.05)。 3．RT-PCR显示： CTX的浓度为2000、1000、500和50μmol/l时，ET-1/GAPDH的比值低于溶剂对照组，表明其可以抑制ET-1基因表达；SVT(10μmol/1和5μmol/l)可以明显抑制ET-1的基因表达。但均缺乏统计学意义。 结论： 1．环磷酰胺、白芍总甙和辛伐他汀对血管内皮细胞的抑制作用随时问延长而增加，在作用足够时间时三种药物均对细胞的增殖有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性。 2．辛伐他汀能明显抑制内皮细胞分泌ET-1，环磷酰胺可以抑制内皮细胞分泌ET-1。 3．辛伐他汀可能明显抑制内皮细胞ET-1基因的表达，环磷酰胺可能抑制内皮细胞ET-1基因的表达。

目录

论文说明：英文缩略词表

前言

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材料和方法

结果

讨论

结论

论文参考文献

综述 影响血管内皮细胞功能和内皮素—1的相关药物的研究

致谢