人体内血清pro-Hepcidin水平检测及其在临床诊断中应用的初步研究

摘要

前言：新发现的小分子肽hepcidin被证实在铁代谢过程中起核心作用，与慢性病贫血、遗传性血色病等关系密切。Hepcidin是一种急性期蛋白，在肝细胞中合成，通过内化降解小肠上皮基底面和巨噬细胞表面的铁转运受体FN1，干扰了铁从肠道的吸收和从巨噬细胞的释放。目前关于hepcidin的研究多局限于实验动物阶段，而在临床研究中，由于血hepcidin分子太小，检测困难，因此难于采用非创伤性方式进行检测人体内hepcidin水平。基于hepcidin前体物质pro-Hepcidin的抗体的ELISA检测试剂盒则已经商品化，但是临床应用的结果缺乏一致性，目前尚不能证实其与肝脏hepcidinmRNA合成水平之间的相关性。 研究目的： 首先分析同一患者肝脏hepcidinmRNA合成水平和血pro-hepcidin水平之间的相关性。 其次，通过检测正常对照、肝硬化和/或肝癌、慢性病贫血(ACD)和缺铁性贫血(IDA)患者的血pro-hepcidin水平，统计学分析血pro-hepcidin在不同铁储备I临床疾病时的水平差异，进一步验证血pro-hepcidin与体内和hepcidin活性之间的关系。 最后，我们检测急性心肌梗死患者起病后不同时间的血pro-hepcidin水平，探讨血pro-hepcidin是否随着急性心肌梗死这样一个应激所致的炎症因子的刺激而改变。 研究方法： 1、收集外科肝脏切除术患者的肝脏标本21例，RT-PCR后进行紫外荧光显像，以Hepcidin与G3PDH的mRNA比值进行半定量分析。 2、同时收集第一部分研究中肝硬化和/或肝癌患者的术前血清，以及正常对照、ACD患者和IDA患者的血清。 3、根据发病后不同时间收集15例再通治疗后的急性心肌梗死患者的血清。 4、血清在-20℃短期贮存后，采用商品化的ELISA试剂盒检测pro-hepcidin水平。 5、采用商品化ELISA试剂盒检测正常对照租ACD患者血IL-6水平。 6、同时收集血红蛋白水平、肝功能、血清铁蛋白水平等指标。 7、统计分析应用SPSS软件，进行非参数检验和t检验，p值＜0.05具有统计学意义。 研究结果： 1、在肝炎后肝硬化和/或肝癌患者中，人肝脏HepcidinmRNA表达水平与血清pro-Hepcidin水平正相关。 2、血清pro-Hepcidin水平和IL-6与血清铁蛋白水平负相关，与血红蛋白水平正相关。 3、ACD患者血清pro-hepcidin水平显著低于正常水平。 4、肝硬化和/或肝癌患者血清pro-hepcidin水平显著低于正常水平。 5、IDA患者血清pro-hepcidin水平显著高于正常水平6急性心肌梗死再通治疗后血pro-hepcidin水平在60小时内没有显著的动态演变。 结论： 1.在肝炎后肝硬化和/或肝癌患者中，血清pro-hepcidin水平可能反映肝脏hepcidinmRNA合成水平，但结论受限于研究人群和研究方法。 2.血清pro-hepcidin可能反映肝功能的受损。 3.与ACD患者血pro-hepcidin水平低于正常对照不同，IDA患者高于正常对照。可以作为ACD和IDA临床鉴别的依据之一。 4.血pro-hepcidin检测结果具有一定的矛盾性，究竟能否真实反映体内hepcidin活性水平，仍然需要进一步的研究。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

前言

第一部分人肝脏Hepcdin mRNA表达与血pro-hepcidin水平相关性研究

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

第二部分慢性病贫血、肝硬化和\或肝癌患者血pro-hepcidin水平与正常对照之间差异的临床研究

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

第三部分缺铁性贫血患者血pro-hepcidin水平与正常对照之间差异的临床研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

第四部分 急性心肌梗死患者再通治疗后血pro-hepcidin水平的动态变化的前驱研究

前言

材料和方法

结果

讨论

最终的讨论

结论

综述Hepcidin临床检测和应用的研究进展

主要仪器与试剂

致谢