胰腺癌“高危评分模型”在社区人群中的应用与评价及胰腺癌相关SNPs在高危人群中应用的初探性研究

摘要

胰腺癌是一种临床表现隐匿、发展迅速和预后极差的消化道恶性肿瘤，早期诊断是提高胰腺癌生存率的最有效方法。然而因症状就诊人群绝大多数为中晚期患者，已失去治疗的最佳时机。确立无症状高危人群并定期随访是提高胰腺癌早期诊断率的关键。国外将那些有胰腺癌家族史和/或患有某些遗传综合征(如遗传性胰腺炎、HNPCC、PJ综合征等)的个体定义为高危人群进行筛查，获得了令人鼓舞的成果，使对无症状高危人群的随访筛查策略为人们接受。然而，文献报道中国散发性胰腺癌占90％～95％以上；如何确定散发性胰腺癌的无症状高危人群目前国内外均未见报道。王丽等研究提示携带MTHFR—677CT及TT基因型者发生胰腺癌风险是CC基因型个体的2.17及3.53倍，提示携带某些特定基因单核苷酸多态性(SNPs)的人群可能是具有肿瘤遗传易感性的高危人群。综合评估环境因素和遗传因素确定无症状高危人群进行筛查是发现早期胰腺癌的重要途径。国内外研究提示，糖尿病患者胰腺癌的发病率可增加1～8倍不等，新发糖尿病患者的胰腺癌年发病可达0.31％，明显高于普通人群发病率。糖尿病是胰腺癌的高危人群还是胰腺癌的早期表现在中国仍需研究，建立糖尿病患者的队列是研究/明确该问题重要的基础。因此，通过对SNPs进行研究寻找胰腺癌遗传易感基因，并与高危评分模型结合，希望获得散发性胰腺癌的无症状高危人群，对他们随访可真正做到胰腺癌的早期诊断。本研究采用北京协和医院率先建立的针对无症状人群高危评分模型，首先验证其在社区无症状高危人群中的应用价值，并探索相关基因多态性与高危评分模型相结合在社区无症状人群中应用的可行性。因此，以胰腺癌早期诊断为目标，以如何确立无症状胰腺癌高危人群为中心，本研究从胰腺癌遗传易感性的SNPs、医院获得的胰腺癌“高危评分模型在社区的应用以及高危因素/人群粗筛与队列建立着手，研究旨在： 1.探讨细胞免疫相关基因CTLA—4和CD86SNPs与胰腺癌遗传易感性的关系； 2.评价高危评分模型在确定社区无症状高危人群中的应用价值；并探索相关基因多态性与高危评分模型相结合的可行性； 3.建立糖尿病与胰腺癌关系研究的前瞻性队列。 一、细胞免疫相关基因单核苷酸多态性与胰腺癌风险关联研究。 方法：采用PCR—RFLP和PCR—SSP方法，对138例胰腺癌患者和278例正常对照组细胞免疫相关基因CTLA—4rs231775、rs5742909和CD86rs1129055、rs9831894进行基因分型。 结果： 1.CTLA—4基因rs231775多态与胰腺癌发病风险增加相关，携带rs231775AG—AA基因型的个体发生胰腺癌风险是GG基因型个体的1.93(95％CI：1.24—3.01，P=0.0032)倍。 2.CD86基因rs9831894多态与胰腺癌发病风险增加相关，携带rs9831894CC基因型的个体发生胰腺癌风险是AA—AC基因型个体的2.27(95％CI：1.03—4.98，P=0.042)倍。 3.单体型分析表明单体型分析表明携带rs1129055G—rs9831894C单体型者发生胰腺癌的风险是rs1129055A—rs9831894A单体型者的1.59(95％CI：1.01—2.50，P=0.048)倍。 小结：本研究证明了CTLA—4和CD86单核苷酸多态与胰腺癌发生风险之间存在相关性，很可能是决定胰腺癌个体遗传易感性的重要因素。 二、胰腺癌无症状高危人群评分模型的社区应用及SNPs的应用初探。 方法：采用以医院为基础建立的“高危评分模型”问卷，对大庆的86个社区55岁以上人群进行问卷，通过计算机进行评分，将分值大于45分人群定义为胰腺癌无症状高危人群进行随访，同时验证/评价高危评分模型在确定社区无症状高危人群中的应用价值。采用PCR—RFLP方法对高危人群中CA19—9≥37U/ml的25例患者进行CTLA—4rs231775基因分型，并与胰腺癌组和正常对照组进行比较。 结果： 1.共筛查29550人；确定高危人群1173人，占调查人数的3.9％，其平均得分65.3±17.8分；非高危人群平均得分为8.7±8.7分，两组有显著性差异(P<0.0001)。 2.2年随访共发现胰腺癌患者3例，其中晚期胰腺癌2例，早期胰腺癌1例，同时还发现其他消化道肿瘤4例。 3.CTLA—4基因rs231775基因型在CA19—9阳性组、胰腺癌组和对照组之间无显著性差异。 小结：该筛检方案可将筛检人群浓集为3.9％高危人群，初步验证了高危人群评分模型社区应用的价值。 三、糖尿病与胰腺癌关系研究前瞻性队列的初步建立。 方法：选择自2009年开始大庆油田总医院集团所属86个社区卫生服务站慢性病登记管理的糖尿病患者作为研究对象，随时将新的新发糖尿病患者纳入队列。通过社区卫生服务站慢病管理登记、大庆市CDC的肿瘤和死亡登记和定期随访获取结局变量。 结果：共收集大庆油田总医院集团所属86个社区卫生服务站登记管理的糖尿病患者共2217例，确诊时的中位年龄52.7岁，平均患糖尿病时间平均85.8±55.20月。新发糖尿病(≤24月)273例，占12.3％。共登记糖尿病患者一级亲属(包括患者的父母和子女)6602人，中位年龄55.9岁。 小结：在大庆市建立了一个资料翔实可靠、设计科学、易于长期随访的前瞻性糖尿病队列人群。 结论： 1.CTLA—4和CD86单核苷酸多态与胰腺癌发生风险之间存在相关性，很可能是决定胰腺癌个体遗传易感性的重要因素； 2.初步验证了胰腺癌无症状高危人群评分模型社区应用的价值； 3.在大庆市建立了一个资料翔实可靠、设计科学、易于长期随访的前瞻性糖尿病队列人群。

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文摘

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论文说明：缩略词表

声明

前言

第一部分 细胞免疫相关基因单核苷酸多态性与胰腺癌风险的关联研究

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 胰腺癌“高危评分模型”的社区应用及SNPs的应用初探

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

第三部分 糖尿病与胰腺癌关系研究前瞻性队列的初步建立

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

结论

文献综述 单核苷酸多态性与肿瘤研究进展

致谢